《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 膠原蛋白肽》向社會(huì)公開征求意見
10月25日，國家衛(wèi)生計(jì)生委就《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 膠原蛋白肽》向社會(huì)公開征求意見。膠原蛋白肽是重要的保健食品、化妝品、健康食品原料，常用于生產(chǎn)蛋白粉、面膜等大健康產(chǎn)業(yè)相關(guān)產(chǎn)品。此標(biāo)準(zhǔn)的建立明確了膠原蛋白肽的定義、原料要求、相關(guān)指標(biāo)，為規(guī)范我國膠原蛋白肽產(chǎn)業(yè)提供了理論依據(jù)。
以下信息及數(shù)據(jù)來源國家衛(wèi)生計(jì)生委
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于以富含膠原蛋白的動(dòng)物組織為原料，經(jīng)過提取、適度水解生產(chǎn)的膠原蛋白肽產(chǎn)品。
2定義
以富含膠原蛋白的新鮮動(dòng)物組織（包括皮、骨、筋、腱、鱗等）為原料，經(jīng)過提取、水解、精制生產(chǎn)的，相對分子質(zhì)量低于10000的粉末狀或顆粒狀的膠原蛋白肽產(chǎn)品。
3技術(shù)要求
相對分子質(zhì)量小于10000的膠原蛋白肽所占比例的檢測方法
1方法提要
高效體積排阻色譜法：
采用高效體積排阻色譜法測定。即以多孔性填料為固定相，依據(jù)樣品組分分子體積大小的差別進(jìn)行分離，在肽鍵的紫外吸收波長220nm條件下檢測，使用相對分子質(zhì)量分布測定的專用數(shù)據(jù)處理軟件（即GPC軟件），對標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的色譜圖及其數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，根據(jù)相對分子質(zhì)量校正曲線方程，計(jì)算得到膠原蛋白肽的相對分子質(zhì)量大小及分布范圍。
2試劑
乙腈：色譜純
三氟乙酸：分析純
水：GB/T 6682規(guī)定的一級水
相對分子質(zhì)量校正曲線所用標(biāo)準(zhǔn)品：
細(xì)胞色素C（cytochrome C,MW12384）
抑肽酶（aprotinin,MW6512）
桿菌酶（bacitracin,MW1423）
乙氨酸－乙氨酸－酪氨酸－精氨酸（MW451）
乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸（MW189）
3儀器和設(shè)備
高效液相色譜儀：配有紫外檢測器和含有GPC數(shù)據(jù)處理軟件的色譜工作站
流動(dòng)相真空抽濾脫氣裝置
超聲波振蕩器
分析天平：感量0.0001g
4色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)
色譜柱：TSKgel G2000 SWXL 300mm×7.8mm(GEL LOT 502R)或性能與此相近的同類型其他適用于測定肽的分子量分布的凝膠柱
流動(dòng)相：乙腈：水：三氟乙酸，體積比為40：60：0.05
檢測波長：220nm
流速：0.5mL/min
柱溫：30℃
進(jìn)樣體積：10μL
為使色譜系統(tǒng)符合檢測要求，規(guī)定在上述色譜條件下，凝膠色譜柱的柱效即理論塔板數(shù)（N）按三肽標(biāo)準(zhǔn)品（乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸）峰計(jì)算不低于5000，蛋白肽的分配系數(shù)（Kd）應(yīng)在0～1之間
5相對分子質(zhì)量校正曲線制作
分別用流動(dòng)相配制成濃度為1.0 g/L左右的上述不同相對分子質(zhì)量的肽標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用孔徑為0.2μm～0.5μm聚四氟乙烯或尼龍過濾膜過濾后分別進(jìn)樣，得到系列標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖。以相對分子質(zhì)量的對數(shù)（lgMW）對保留時(shí)間作圖或作線性回歸得到相對分子質(zhì)量校正曲線及其方程。
6樣品制備
用稱量紙稱取樣品125.0mg左右，轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，超聲振蕩10min，使樣品充分溶解混勻，用孔徑為0.2μm～0.5μm聚四氟乙烯或尼龍過濾膜過濾，其濾液用于測定。
7相對分子質(zhì)量的計(jì)算
將A.6制備的樣品溶液在A.4色譜條件下進(jìn)樣分析，然后使用GPC數(shù)據(jù)處理軟件，根據(jù)相對分子質(zhì)量校正曲線方程對樣品的色譜圖及其數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算處理，即可得到樣品中膠原蛋白肽的相對分子質(zhì)量大小及分布范圍。用峰面積歸一化法計(jì)算相對分子質(zhì)量在10000以下的膠原蛋白肽相對百分比之和。
